Elisa LH Test Strip ISO13485 Lüteinizan Hormon Test Kiti 96 Parça

LH Elisa Kit Lüteinizan Hormon

1. Kullanım amacı

İnsan serumunda luteinize edici hormonun in vitro kantitatif tayini için immünoanaliz.

2. Özet

• LH (luteinize edici hormon), FSH (folikül uyarıcı hormon) ile birlikte, gonadotropin ailesine aittir.LH ve FSH büyümeyi düzenler ve uyarır ve gonadların (yumurtalıklar ve testisler) sinerjik olarak işlevi.FSH, TSH gibi hCG, LH, iki alt birimden (α- ve β-zincirleri) oluşan bir glikoproteindir.(1, 2, 3) 121 amino asit ve üç şeker zincirinden oluşan bu proteohormonun moleküler ağırlığı 29500 daltondur.Kadınlarda gonadotropinler, adet döngüsünü kontrol etmek için hipotalamus-hipofiz-yumurtalık düzenleyici devre içinde hareket eder.
• LH ve FSH, ön hipofizin gonadotropik hücrelerinden atımlar halinde salınır ve kan dolaşımı yoluyla yumurtalıklara geçer.Burada gonadotropinler, folikülün büyümesini ve olgunlaşmasını ve dolayısıyla östrojen ve progesteronların biyosentezini uyarır.En yüksek LH-konsantrasyonları, siklusun ortasındaki zirve sırasında meydana gelir ve yumurtlamayı ve ana salgı ürünü progesteron olan korpus luteumun oluşumunu indükler.Testislerin Leydig hücrelerinde LH, testosteron üretimini uyarır.LH konsantrasyonunun belirlenmesi, hipotalamus-hipofiz-gonad sistemi içindeki işlev bozukluklarının aydınlatılmasında kullanılır.Birlikte LH tayini FSH ile aşağıdaki endikasyonlar için kullanılır: kromozom aberasyonları (örn. Turner sendromu), polikistik overler (PCO), amenore nedenlerinin açıklığa kavuşturulması, menopoz sendromu ve şüpheli Leydig hücre yetmezliği olan konjenital hastalıklar.(1, 4, 5)

3. Test prensibi

Sandviç prensibi.Toplam tahlil süresi: 80 dakika.

• Numune, Anti-LH kaplı mikro kuyular ve Anti-LH etiketli enzim birleştirilmiştir.

• İnkübasyon sırasında numunede bulunan LH'nin reaksiyona girmesine izin verilir.

iki antikorla eşzamanlı olarak, LH moleküllerinin

katı faz ve enzime bağlı antikorlar arasına sıkıştırılır.

• Yıkamadan sonra katı faz, numune içindeki LH ve enzime bağlı antikorlar arasında immünolojik reaksiyonlarla bir kompleks oluşur.

• Daha sonra substrat solüsyonu eklenir ve bu kompleks tarafından katalize edilir, bu da bir kromojenik reaksiyonla sonuçlanır.Ortaya çıkan kromojenik reaksiyon, absorbans olarak ölçülür.

• Absorbans, numunedeki LH miktarı ile orantılıdır.

reaktifler

Sağlanan malzemeler

• Kaplı Mikroplaka, 8 x 12 şerit, 96 kuyu, fare monoklonal ile önceden kaplanmış

Anti-LH.

• Kalibratörler, 6 şişe, her biri 1 ml, kullanıma hazır;Konsantrasyonlar: 0(A), 5(B), 20(C), 50(D), 100(E) ve 200(F) mIU/mL.

• Enzim Eşleniği, 1 şişe, BSA (sığır serum albümini) içeren Tris-NaCl tamponu içinde 11 mL HRP (yaban turpu peroksidaz) etiketli fare monoklonal Anti-LH.%0,1 ProClin300 koruyucu içerir.

• Substrat, 1 şişe, 11ml, kullanıma hazır, (tetrametilbenzidin) TMB.

• Durdurma Çözeltisi, 1 şişe, 6,0 ml 1 mol/L sülfürik asit.

• Yıkama Çözeltisi Konsantresi, 1 şişe, 25 mL (40X konsantre), PBS-Tween

yıkama solüsyonu.

• Kullanım Talimatları, 1 kopya.

• Plaka Kapağı: 1 adet.

Gerekli malzemeler (ancak sağlanmadı)

• 450nm ve 620nm dalga boyunda emici özelliği olan mikroplaka okuyucu.

• Mikroplaka yıkayıcı.

• İnkübatör

4. Test prosedürü

• Yalnızca gerekli sayıda kuyu kullanın ve mikroplakaların kuyularını aşağıdakiler için biçimlendirin:

Her bir kalibratör ve test edilecek numune.

• Her kuyucuğa 25 μL kalibratör veya numune ekleyin.

• Her kuyucuğa 100 μL enzim konjugatı ekleyin.

• Mikroplakayı karıştırmak için 30 saniye hafifçe sallayın.

• Plakayı bir plaka kapağı ile kapatın ve 37 °C'de 60 dakika inkübe edin.

• Mikro plakanın içeriğini dekantasyon veya aspirasyon yoluyla atın.Eğer

boşaltın, hafifçe vurun ve emici kağıtla plakayı kurulayın.

• 350 μL yıkama solüsyonu ekleyin, boşaltın (dokun ve blot) veya aspire edin.Toplam 5 yıkama için 4 kez daha tekrarlayın.Otomatik bir mikroplaka şerit yıkayıcı kullanılabilir.Yıkamanın sonunda, plakayı ters çevirin ve kalan yıkama solüsyonunu emici kağıt üzerine hafifçe vurun.

• Her kuyucuğa 100 μL substrat ekleyin.

• Ortam sıcaklığında (18-25℃) karanlıkta reaksiyon için 20 dakika inkübe edin.Substate ilavesinden sonra plağı sallamayın.

• Her kuyucuğa 50 µl durdurma solüsyonu ekleyin.

• Kuyuların içindeki sıvının karışması için 15-20 saniye çalkalayın.Bu önemli

mavi rengin tamamen sarıya dönüşmesini sağlayın.

• Her kuyunun absorbansını 450 nm'de okuyun (620 ila 630 nm'yi kullanarak

Kuyu kusurlarını en aza indirmek için referans dalga boyu) bir mikro plaka okuyucuda.